Advanced DMEM/F12培養(yǎng)基是一款可以減少胎牛血清（FBS）添加量，廣泛應(yīng)用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基，與經(jīng)典DMEM/F12培養(yǎng)基相比，在保持細(xì)胞生長(zhǎng)速率和形態(tài)的情況下，血清用量可減少50-90%，從而降低細(xì)胞培養(yǎng)過程中血清用量，有效降低細(xì)胞培養(yǎng)成本。許多細(xì)胞系不需要馴化即可使用這種培養(yǎng)基，無需馴化即可成功培養(yǎng)的細(xì)胞包括Vero、LX-2、KGN、C8-D1A、Hela、NIH-3T3、KLE、ARPE-19、4T1、NIH-3T3、JHH-7、NCI-H2009等。

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品使用說明

1. Advanced DMEM/F12培養(yǎng)基作為一款減血清培養(yǎng)基，能達(dá)到減血清效果是因?yàn)樘砑恿艘韵鲁煞郑阂掖及贰⒐入赘孰?、抗壞血酸、胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、牛血清白蛋白以及多種微量元素（亞硒酸鈉、偏釩酸銨、硫酸銅和氯化錳）。

2. Advanced DMEM/F12培養(yǎng)基使用時(shí)需要補(bǔ)充1–5%胎牛血清和L-丙氨酰-L-谷氨酰胺溶液（GlutaMAX）（貨號(hào):PB180419）以維持細(xì)胞正常生長(zhǎng)。

3. 部分細(xì)胞培養(yǎng)使用胎牛血清（FBS）的推薦添加量：

（列表以外的細(xì)胞請(qǐng)參考下方方法測(cè)試優(yōu)化）

       對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞系，使用Advanced培養(yǎng)基時(shí)不需要適應(yīng)，可直接降低血清50%而不影響細(xì)胞狀態(tài)，參考直接適應(yīng)方法。如果觀察到細(xì)胞生長(zhǎng)速度變慢、形態(tài)改變、次級(jí)代謝物產(chǎn)生水平不理想或需要進(jìn)一步降低血清濃度時(shí)，則需采取一定的方法使之間接適應(yīng)低血清環(huán)境，參考間接適應(yīng)法。

直接適應(yīng)

(1) 直接使用降低50%胎牛血清的Advanced培養(yǎng)基，替換原有的常規(guī)完全培養(yǎng)基，按照常規(guī)培養(yǎng)方法換液和傳代培養(yǎng)。

(2) 細(xì)胞能夠持續(xù)增長(zhǎng)維持3代以上，可以認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)適應(yīng)新培養(yǎng)基。

注:如果培養(yǎng)過程中觀察到細(xì)胞狀態(tài)不佳，則需采用間接自適應(yīng)的方法。

間接適應(yīng)

(1) 采取Advanced完培：原配方完培=25:75的比例混合新舊培養(yǎng)基；

(2) 監(jiān)測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)和傳代培養(yǎng)，逐步增加新培養(yǎng)基與原始培養(yǎng)基的比例直至全部更換為新的Advanced培養(yǎng)基，參考25:75→50:50→75:25→90:10→100：0的順序，每個(gè)步驟可能需要多次重復(fù)直至細(xì)胞100%適應(yīng)新的減血清培養(yǎng)基。

(3) 在100%的Advanced減血清完全培養(yǎng)基中細(xì)胞持續(xù)增長(zhǎng)3代以上，可認(rèn)為已適應(yīng)新培養(yǎng)基。

注意事項(xiàng)

1. 并非所有的細(xì)胞都適合減血清培養(yǎng)，務(wù)必小量測(cè)試使用效果后進(jìn)行替換，必要時(shí)需針對(duì)每種細(xì)胞系優(yōu)化胎牛血清濃度，以達(dá)到較大限度的減少血清添加量；

2. 本產(chǎn)品已過濾除菌，使用時(shí)應(yīng)注意無菌操作，避免污染；

3. 為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果，請(qǐng)勿進(jìn)行凍融處理；

4. 本產(chǎn)品僅用于科研或進(jìn)一步研究使用，不用于診斷和治療。

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