Q1:BV2細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞拉絲、觸角較多，如何調(diào)整？

BV2細(xì)胞以較低密度傳代后，容易出現(xiàn)拉絲、觸角較多的情況。這種情況可以先收集培養(yǎng)基中懸浮或貼壁不牢的細(xì)胞于15 mL離心管中，貼壁的細(xì)胞用胰酶消化1 min左右后終止消化，收集消化下來(lái)的的細(xì)胞（多觸角或者拉絲很長(zhǎng)的細(xì)胞，短時(shí)消化不容易消化下來(lái)，可以被篩掉），然后計(jì)數(shù)傳代，培養(yǎng)一段時(shí)間后細(xì)胞狀態(tài)會(huì)有好轉(zhuǎn)。沒(méi)有消化下來(lái)的細(xì)胞也可以提高細(xì)胞密度傳代，重復(fù)此步驟，收集偏圓形的細(xì)胞培養(yǎng)。

Q2:BV2細(xì)胞剛收到貨時(shí)，細(xì)胞整體偏圓形較多，而后續(xù)培養(yǎng)時(shí)梭形較多是怎么回事？

細(xì)胞形態(tài)會(huì)隨著密度的改變發(fā)生變化。BV2細(xì)胞增殖較快，到貨時(shí)由于運(yùn)輸震蕩的原因，部分細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)收縮，此時(shí)細(xì)胞密度較高，圓形相對(duì)較多；在后續(xù)培養(yǎng)中，按照1:2~1:4傳代24 h時(shí)，細(xì)胞主要以梭形為主；后續(xù)隨著細(xì)胞密度越來(lái)越高，圓形細(xì)胞會(huì)逐漸變多。

Q3:BV2細(xì)胞形態(tài)變?yōu)榘⒚装蜆?/h4>

小膠質(zhì)細(xì)胞是一種可塑性極高的細(xì)胞，可通過(guò)特定因素激活，從而發(fā)揮其免疫功能。從靜息態(tài)變?yōu)榧せ顟B(tài)的過(guò)程中，小膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)也隨之發(fā)生改變。 實(shí)驗(yàn)中常用細(xì)菌脂多糖（LPS）和干擾素-γ（IFNγ），分別模擬細(xì)菌和病毒感染，來(lái)刺激小膠質(zhì)細(xì)胞激活。受到刺激的小膠質(zhì)細(xì)胞突起縮短變厚，胞體增大，呈現(xiàn)阿米巴樣（如下圖所示）。 但有的時(shí)候BV2形態(tài)變化并不明顯，還需要結(jié)合其他實(shí)驗(yàn)，如檢測(cè)NO、IL-13等炎癥因子的表達(dá)，來(lái)確定BV2是否被定向激活。

Q4:BV2細(xì)胞形態(tài)的問(wèn)題：培養(yǎng)過(guò)程梭型細(xì)胞比圓形細(xì)胞多，梭型是不是細(xì)胞分化了？

細(xì)胞受到LPS刺激后易分化，而常規(guī)培養(yǎng)過(guò)程是不會(huì)自發(fā)分化的。關(guān)于哪種形態(tài)是分化，并沒(méi)有統(tǒng)一的定論，有的文獻(xiàn)描述分化細(xì)胞是長(zhǎng)梭型細(xì)胞增加，有的文獻(xiàn)稱(chēng)分化細(xì)胞偏圓形，建議通過(guò)檢測(cè)相關(guān)的指標(biāo)變化來(lái)判斷是否分化。 該細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)，高密度下貼壁的細(xì)胞形態(tài)會(huì)偏圓形，低密度下貼壁細(xì)胞形態(tài)會(huì)偏長(zhǎng)條形。密度比較高的時(shí)候，漂浮的細(xì)胞會(huì)聚團(tuán)。存在圓形和梭形兩種細(xì)胞形態(tài)。

Q5:BV2細(xì)胞是激活態(tài)還是靜息態(tài)？

在基礎(chǔ)培養(yǎng)條件下，BV2細(xì)胞通常處于靜息狀態(tài)，也可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，調(diào)控BV2為靜息狀態(tài)或激活狀態(tài)。BV2是一種半貼壁半懸浮細(xì)胞，它的形態(tài)并不規(guī)則，存在圓形和梭形兩種，有的文獻(xiàn)中說(shuō)梭型的細(xì)胞是極化的，有的文獻(xiàn)中說(shuō)圓形的細(xì)胞是極化的，但是在實(shí)際培養(yǎng)過(guò)程中，圓形和梭型細(xì)胞并沒(méi)有一個(gè)特定比例，判斷哪種形態(tài)的細(xì)胞是激活態(tài)和靜息態(tài)，無(wú)法通過(guò)形態(tài)辨認(rèn)，細(xì)胞是否被定向激活，需要結(jié)合實(shí)驗(yàn)來(lái)檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)的表達(dá)情況，如NO、IL-13等炎癥因子的表達(dá)。 可以通過(guò)添加特定的誘導(dǎo)物（如LPS、IFN-γ等），以誘導(dǎo)其進(jìn)入激活狀態(tài)。

Q6:BV2用MEM培養(yǎng)可以嗎？

可以的，這個(gè)細(xì)胞有兩種培養(yǎng)條件，DEME和MEM，所以使用MEM培養(yǎng)BV2細(xì)胞是可行的，但需要確保培養(yǎng)基中含有足夠的營(yíng)養(yǎng)成分，如血清和其他補(bǔ)充物。如果在使用MEM過(guò)程中遇到生長(zhǎng)緩慢或細(xì)胞狀態(tài)不佳的問(wèn)題，可以考慮調(diào)整培養(yǎng)基成分或改為使用DMEM。通過(guò)仔細(xì)觀察和記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)并根據(jù)需要調(diào)整培養(yǎng)條件，可以確保BV2細(xì)胞在DEME或MEM培養(yǎng)基中的良好生長(zhǎng)。