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細胞學(xué)堂 | 注意這三點，讓你的4T1細胞養(yǎng)得更漂亮

來源：Pricella　　瀏覽量：　　發(fā)布時間：2023-02-16 09:28:59

4T1(小鼠乳腺癌細胞)是從410.4瘤株中未經(jīng)誘變篩得的6-硫鳥嘌噙抗性細胞株，它的高腫瘤發(fā)生率和存活率使其成為動物水平乳腺癌研究的理想細胞模型。因此本期細胞學(xué)堂整理了4T1細胞的特性和收貨、培養(yǎng)注意事項，幫助大家快速上手、開展實驗。

圖1. 4T1細胞正常生長圖片

ONE

細胞特性

4T1乳腺癌是一種免疫原性低、惡性程度高的腫瘤，在乳腺原發(fā)腫瘤生長后，可迅速自發(fā)地轉(zhuǎn)移到淋巴結(jié)、肺、肝、腦和血液^[1]；

BALB/c衍生的小鼠乳腺癌4T1，在其免疫原性，轉(zhuǎn)移特性和生長特征方面非常接近人類乳腺癌^[2];

4T1生長特征與高浸潤性人轉(zhuǎn)移性乳腺癌相似，在手術(shù)時，疾病程度與人類IV期乳腺癌相當，并且可將免疫原性差的小鼠4T1乳腺癌確立為術(shù)后動物模型^[3]。

TWO

收貨注意事項

將細胞放入培養(yǎng)箱靜置2-4h，觀察細胞狀態(tài)；

若細胞脫落較多，可將原瓶培養(yǎng)液離心收集沉淀，按照收貨指南消化處理后與原瓶細胞貼壁細胞合并并接種；

若細胞基本沒有脫落情況，80%左右密度可按1:3~1:4傳代，100%密度可1:5傳代。

THREE

培養(yǎng)注意事項

該細胞生長速度快，細胞匯合度越高越難消化，建議分次消化。一次消化至有細胞移動漂浮時終止，再進行二次消化剩余的細胞，盡量消化成單顆細胞，細胞傳代第二天有少量細胞團貼壁未展開為正?，F(xiàn)象，繼續(xù)培養(yǎng)細胞會展開；

若在培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞變圓現(xiàn)象，有可能是細胞密度過大，無法展開的原因，可通過降低傳代密度來改善；

4T1細胞推薦生長培養(yǎng)基：RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S。

參考文獻

[1] Pulaski BA, Clements VK, Pipeling MR, Ostrand-Rosenberg S. Immunotherapy with vaccines combining MHC class II/CD80+ tumor cells with interleukin-12 reduces established metastatic disease and stimulates immune effectors and monokine induced by interferon gamma. Cancer Immunol Immunother. 2000 Apr;49(1):34-45.

[2] Pulaski BA, Ostrand-Rosenberg S. Reduction of established spontaneous mammary carcinoma metastases following immunotherapy with major histocompatibility complex class II and B7.1 cell-based tumor vaccines. Cancer Res. 1998 Apr 1;58(7):1486-93.

[3] Pulaski BA, Terman DS, Khan S, Muller E, Ostrand-Rosenberg S. Cooperativity of Staphylococcal aureus enterotoxin B superantigen, major histocompatibility complex class II, and CD80 for immunotherapy of advanced spontaneous metastases in a clinically relevant postoperative mouse breast cancer model. Cancer Res. 2000 May 15;60(10):2710-5.