適用細胞系 

雜交瘤無血清培養(yǎng)基是普諾賽研發(fā)團隊開發(fā)的無血清產(chǎn)品，適用于雜交瘤、骨髓瘤細胞的高密度生長和蛋白的穩(wěn)定表達。 

培養(yǎng)基特性

1. 本品不含血清，含有少量水解物、蛋白、生長因子組分。

2. 培養(yǎng)基含有L-谷氨酰胺和HT。 

培養(yǎng)條件

1. 培養(yǎng)溫度37℃±0.5℃，搖床轉(zhuǎn)速100-120rpm（振幅50 mm）。

2. 在非自動控制pH值條件下，建議CO₂濃度控制在5%。

3. pH、DO及溫度等工藝條件可根據(jù)工藝開發(fā)結(jié)果或平臺工藝參數(shù)設定。

培養(yǎng)基適應（推薦）

1. 直接適應：最初培養(yǎng)階段，細胞按初始密度 0.75×10⁶cells/mL 接種，直接將培養(yǎng)基更換為雜交瘤無血清培養(yǎng)基，進行細胞培養(yǎng)。待細胞培養(yǎng)2-3代，且細胞生長穩(wěn)定后進行后續(xù)實驗。雜交瘤細胞穩(wěn)定生長時按照0.75×10⁶cells/mL密度接種，培養(yǎng)48h后細胞密度可達3-5×10⁶ cells/mL。

2. 間接適應：雜交瘤無血清培養(yǎng)基與細胞原培養(yǎng)基1:1比例混合，培養(yǎng)細胞，連續(xù)傳代2-3代，細胞穩(wěn)定生長后可將培養(yǎng)基更換為雜交瘤無血清培養(yǎng)基，連續(xù)傳代2-3代，細胞生長穩(wěn)定后進行后續(xù)實驗。雜交瘤細胞穩(wěn)定生長時按照0.75×10⁶cells/mL密度接種，培養(yǎng)48h后細胞密度可達3-5×10⁶cells/mL。

（注：具體培養(yǎng)工藝可根據(jù)實際項目需求自行調(diào)整）

數(shù)據(jù)支撐

細胞凍存

1. 使用本品制成的凍存培養(yǎng)基進行細胞凍存，配制細胞凍存液：凍存液=70%培養(yǎng)基+20%FBS(建議使用進口胎牛血清)+10%DMSO，凍存液配好后置于4℃冰箱預冷(凍存液配制時，先加培養(yǎng)基再加血清或DMSO，防止DMSO濃度過高導致血清有效成分變性)。

2. 細胞凍存密度1.5-2.0×10⁷cells/mL，推薦2.0×10⁷cells/mL。

保存條件

2-8℃，避光保存，有效期12個月。

SF3001 雜交瘤無血清培養(yǎng)基.pdf