細胞學堂 | 收到的細胞脫落了？碎片多？黑點多？

科學研究中需要用到各種細胞系作為實驗模型，這些細胞系通?？梢詮母鞔蠹毎麕飓@取。

而在收到細胞庫寄送來的常溫細胞時，常常會遇到一些問題，比如細胞脫落、皺縮、有黑點。

這篇文章將幫助大家解決這些常見問題。

一、收貨時，細胞脫落

有些細胞本身貼壁不牢，很容易造成細胞脫落（如293系列，TM3，TM4，Raw264.7，原代內(nèi)皮細胞，原代平滑肌細胞）。

另外，運輸過程中受到碰撞或氣溫過低，也可能導致細胞脫落。

處理辦法

① 將脫落細胞進行離心收集，并在離心管中消化。

② 仍然貼壁的細胞，按照常規(guī)方法加入胰酶或其他解離劑消化。

③ 再將消化好的脫落細胞和貼壁細胞混合，按比例接種到新的培養(yǎng)器皿中。

常溫運輸?shù)腃2C12細胞收貨時發(fā)現(xiàn)脫落細胞

C2C12細胞處理后第二天，有少量漂浮細胞

C2C12細胞處理后第四天，細胞正常生長

（圖片由客戶提供，僅供學習參考）

二、收貨時，細胞皺縮

運輸過程中，路途顛簸加上溫度不穩(wěn)定，常溫細胞會發(fā)生回縮。

處理辦法

放入培養(yǎng)箱靜置2-4小時，若4小時后仍然沒有伸展，延長靜置時間。注意，過夜靜置時，需倒出部分培養(yǎng)基，留5-10mL在瓶中，瓶蓋擰松透氣，保持氣體交換（L15培養(yǎng)體系除外）。

若有脫落細胞，需離心收集。

SH-SY5Y細胞發(fā)貨前狀態(tài)(普諾賽提供)

SH-SY5Y細胞收貨后狀態(tài)(客戶提供)

SH-SY5Y細胞收貨時皺縮、脫落

SH-SY5Y細胞處理后第三天

（圖片由客戶提供，僅供學習參考）

三、收貨時，細胞黑點較多

當受到運輸環(huán)境影響時，細胞會發(fā)生應激反應，分泌活動增加，導致分泌蛋白增多，呈黑色圓球狀，分布無規(guī)律。

同時，路途中凋亡的細胞碎裂后將產(chǎn)生細胞碎片，為黑色或透明色，呈不規(guī)則狀，分布無規(guī)律。

另外，有些細胞本身分泌活動較強，培養(yǎng)時常伴隨黑點。

處理辦法

★貼壁細胞放培養(yǎng)箱靜置2-4小時后，正常換液或傳代；

★懸浮細胞800~1000rpm（約160~200g） 低速離心3min去除細胞碎片。通常培養(yǎng)數(shù)天后，細胞狀態(tài)會逐漸穩(wěn)定下來。

KYSE-30細胞收貨時觀察到細胞碎片

KYSE-30細胞繼續(xù)培養(yǎng)后細胞碎片減少

（圖片由客戶提供，僅供學習參考）

小貼士：遇到小黑點問題時，首先要排除微生物污染，再按以上辦法解決哦~

細胞碎片/分泌物和微生物污染的區(qū)別

細胞碎片（由客戶提供，僅供學習參考）

微生物污染（由客戶提供，僅供學習參考）