細胞學堂 | UMNSAH/DF-1（雞胚成纖維細胞）空泡產(chǎn)生的原因及解決方法

UMNSAH/DF-1細胞在收貨時經(jīng)常會遇到“空泡”問題，今天給大家分享一下，空泡產(chǎn)生的原因，以及解決空泡問題的方法。

先了解一下UMNSAH/DF-1細胞的各項信息，如下：

細胞名稱：UMNSAH/DF-1（雞胚成纖維細胞）

種屬：家雞

組織來源：胚胎，自發(fā)永生化

生長特性：貼壁細胞

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

生長培養(yǎng)基：DMEM＋10% FBS＋1% P/S

培養(yǎng)環(huán)境：氣相：95%空氣；5%CO2             溫度：39℃

推薦傳代比例：1:3-1:4

凍存液配方：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

細胞中的空泡一般指在光學顯微鏡下可見的, 具有不同于細胞質(zhì)光學特征的泡狀物。細胞中形成空泡的過程和現(xiàn)象稱為空泡化。空泡可以來源于細胞內(nèi)所有膜結(jié)構(gòu)的細胞器，如線粒體，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，溶酶體，高爾基體，自噬溶酶體等。

以 UMNSAH/DF-1細胞為例，在發(fā)貨前，細胞狀態(tài)是正常的（如圖1），可是在收貨后卻產(chǎn)生了很多空泡。這究竟是什么原因呢？

其實，這是因為UMNSAH/DF-1細胞在發(fā)貨過程中，容易受到溫度波動影響，而導(dǎo)致的細胞空泡增多。當細胞受到外界環(huán)境因素影響如溫度時，細胞會發(fā)生內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)。細胞溫度降低時，細胞膜上磷脂分子的運動減慢，流動性降低，從而降低了細胞膜對物質(zhì)的通透性，鈣離子內(nèi)流，從而導(dǎo)致細胞質(zhì)中色素堆積，空泡形成。

處理方法：

將收到的細胞正常傳代，觀察空泡是是否有減少，若空泡仍有很多，可增加傳代次數(shù)，一般正常傳代后這種情況就會有所好轉(zhuǎn)?。ㄈ鐖D2所示。）

圖1. UMNSAH/DF-1發(fā)貨圖片

圖2. UMNSAH/DF-1收貨圖片（左） 傳代培養(yǎng)后圖片（右）

注意

細胞培養(yǎng)的最佳溫度主要取決于細胞供體的體溫，此外也受到解刨部位體溫差異的影響。對于不同的動物細胞，所需要的培養(yǎng)溫度也有所不同，對于禽類動物細胞，最佳培養(yǎng)溫度為39℃，所以UMNSAH/DF-1細胞的最佳培養(yǎng)溫度也為39℃。37℃培養(yǎng)會影響細胞狀態(tài)，建議提前準備專用培養(yǎng)箱。

若我們在培養(yǎng)細胞過程中出現(xiàn)了空泡，也有可能是細胞凋亡或是營養(yǎng)不夠等原因，針對不同的情況需要采用不同的解決辦法。在實驗中，我們可以通過時刻關(guān)注細胞的狀態(tài)，及時換液，采用優(yōu)質(zhì)血清，保證細胞所需營養(yǎng)充足等，避免空泡的出現(xiàn)。

參考文獻

[1] Jing Q C ,  Zhao J ,  Zhao B X , et al. The vacuolization and differentiation of vascular endothelial cells by a γ-butyrolactones derivative[J]. Journal of Shandong University, 2008.

[2] 張浩赟等. 胞質(zhì)空泡化的研究進展[J]. 世界最新醫(yī)學信息文摘, 2017, 17(34):3.