細胞學堂 | 血清批次存在差異怎么辦

血清對細胞實驗的重要性毋庸置疑。在往期的細胞學堂推文中，普諾賽向大家介紹了血清沉淀的相關(guān)問題。除了血清沉淀之外，血清批次差異也是血清使用過程中經(jīng)常會遇到的問題，也是很多科研工作者在挑選血清時容易忽視的問題。

一、不同批次血清存在差異的原因

1、血清來源于動物，其組成成分有上千種左右；

2、血清組成及含量常隨供血動物的年齡、生理條件和營養(yǎng)條件而異；

3、每個批號的組分百分比含量都不固定，所以批間差異是存在的。

二、不同批次血清存在差異時細胞的表現(xiàn)

不同批次血清存在差異時，細胞形態(tài)會發(fā)生變化，但其對細胞的影響遠不止是形態(tài)的變化。整體來說，主要表現(xiàn)在以下幾個方面：

細胞形態(tài)發(fā)生改變；

細胞貼壁性改變；

細胞產(chǎn)生空泡細胞；

細胞生長變得緩慢；

細胞不增殖；

圖1. SH-SY5Y細胞更換血清后形態(tài)變化

圖2. Hela細胞更換血清后形態(tài)變化

圖3. SK-N-AS細胞更換血清出現(xiàn)圓形細胞

三、如何避免更換血清后對細胞的影響

• 使用新的血清前，先使用血清試用裝，如果試用效果好，則可購買和試用裝批次相同的正裝，囤積半年或一年的用量，避免批間差造成實驗波動(胎牛血清在-20°C保存可達5年) ；

• 建議加高血清比例到15%或20%；

• 試用新批次，如果新批次效果好，可更換血清批次;

• 馴化過渡;

• 輕度不適應細胞可自己調(diào)整。

L-929

圖4. L-929細胞剛更換血清（左） 適用一周后（右）

Renca

圖5. Renca細胞剛更換血清（左） 適用一周后（右）