細胞學(xué)堂 | SK-BR-3總是漂怎么辦

SK-BR-3 [SKBR3]細胞（人乳腺腺癌細胞）是由Trempe·G和Old·L·J于1970年從一位43歲的白人女性乳腺癌患者的胸腔積液中分離得到的。SK-BR-3 [SKBR3]細胞過表達HER2/c-erb-2基因產(chǎn)物。

圖1. SK-BR-3正常生長圖片

培養(yǎng)SK-BR-3細胞時，最容易遇到的問題就是漂浮。SK-BR-3細胞從冷凍保存中恢復(fù)的速度可能很慢，并且在低溫保存恢復(fù)過程中可能會不貼壁，但這是正?，F(xiàn)象。SK-BR-3細胞在培養(yǎng)的第一周以及每次繼代培養(yǎng)后都會出現(xiàn)松散的附著和漂浮的細胞。

如果存在大量漂浮物，尤其是在生長的第一周，復(fù)蘇后幾天內(nèi)最好保持細胞不受干擾；在剛收到細胞時，可根據(jù)細胞密度進行傳代，傳代后3天不要動該細胞（如果培養(yǎng)基變色不明顯的話），處理后細胞鋪展?fàn)顟B(tài)良好（如圖2）。

圖2. 處理后的SK-BR-3細胞

（圖片來源于客戶，僅供學(xué)習(xí)參考）

如果仍然有很多漂浮物，可用臺盼藍檢查細胞是否存活?？蓪⑵〉募毎占饋恚ㄟ^輕輕離心保留漂浮細胞，并在更換培養(yǎng)基時將其與附著的細胞一起添加回同一培養(yǎng)容器中，不要分離或丟棄漂浮細胞。

細胞最初會以小斑塊或細胞群的形式附著，許多細胞團仍處于懸浮狀態(tài)，幾天后，細胞將貼壁生長并向外延伸，有時也會出現(xiàn)一些細胞碎片，通過換液可去除。

注意事項

1、漂浮細胞應(yīng)始終通過溫和離心（125xg，持續(xù)5至7分鐘）保留，并在換液或傳代后放回培養(yǎng)容器；

2、SK-BR-3細胞傾向于相互堆積。在細胞達到70-80%匯合度之前不要用胰酶消化處理細胞。如果讓細胞過度生長，細胞就會分離漂??；

3、1周傳代1次，若密度低，生長一周后可以1:1傳代重新鋪板一次，細胞形態(tài)會好看很多。