SU-DHL-6(人彌散性組織淋巴瘤細(xì)胞)(STR鑒定正確)
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英文名稱:SU-DHL-6
貨號(hào): CL-0746
價(jià)格: ¥1500 ¥1500
注:凍存細(xì)胞需加收干冰運(yùn)費(fèi),詳情請(qǐng)咨詢客服。
SU-DHL-6(人彌散性組織淋巴瘤細(xì)胞)
¥1500
套餐組合價(jià)
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | SU-DHL-6(人彌散性組織淋巴瘤細(xì)胞) |
別稱 | SUDHL6;SuDHL6;SU-DHL6;SUDHL-6;SuDHL-6;Sudhl-6;SUD6;Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6;DHL-6;DHL6 |
種屬 | 人 |
生長特性 | 懸浮細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 淋巴母細(xì)胞樣 |
凍存條件 |
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% DMSO 溫度:液氮 |
培養(yǎng)方案A(默認(rèn)) |
生長培養(yǎng)基:RPMI-1640 [PM150110]+10% FBS [164210]+1% P/S [PB180120] 培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO?,5%, 溫度:37℃ |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 3-4天/次 |
參考資料(來源文獻(xiàn))
背景描述 | 從一名43歲的B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)患者的腹腔積液中建立,當(dāng)時(shí)描述為彌漫性、混合性小細(xì)胞和大細(xì)胞型;細(xì)胞系攜帶EZH2 Y641N突變;屬于GCB樣淋巴瘤亞型(生發(fā)中心B細(xì)胞)。外顯子和RNA序列數(shù)據(jù)可用(參見參考文獻(xiàn)18187和外顯子序列和RNA序列) |
年齡(性別) | 43Y;Female |
組織來源 | 腹腔積液 |
細(xì)胞類型 | 腫瘤細(xì)胞 |
腫瘤類型 | 淋巴瘤細(xì)胞 |
生物安全等級(jí) | BSL-1 |
保藏機(jī)構(gòu) | AddexBio; C0003011/4672 ATCC; CRL-2959 CCTCC; GDC0164 DSMZ; ACC-572 KCB; KCB 2016029YJ-A |
位點(diǎn)信息
鑒定圖
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Q1:怎么去除死細(xì)胞?
低速離心(800rpm,離心3mim),主要是基于細(xì)胞密度和大小進(jìn)行分離,死細(xì)胞和碎片比較輕,會(huì)殘留在上清,活的細(xì)胞會(huì)留在離心管底部哈。這個(gè)可以去除大部分死細(xì)胞和碎片,但不能完全去除(會(huì)有少許殘留)。
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Q2:有些細(xì)胞傳了幾代之后,突然出現(xiàn)了一些圓形的漂浮細(xì)胞,這是正常情況?
這個(gè)是正常的,細(xì)胞增殖是個(gè)動(dòng)態(tài)的過程,每個(gè)細(xì)胞所處的狀態(tài)不完全一樣,這種漂浮的細(xì)胞里面可能是增殖后還未來的及貼下去的,也可能是一些衰老細(xì)胞,我們每次傳代的操作多少會(huì)引起一些細(xì)胞損傷導(dǎo)致細(xì)胞貼壁性能減弱。只要整體細(xì)胞增殖情況正常,存在少量這種細(xì)胞,可以繼續(xù)培養(yǎng)觀察看看。
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Q3:剛買回來的細(xì)胞傳多少代就凍存比較好?
建議細(xì)胞買回來擴(kuò)增1~2代后先凍存一管,一周后復(fù)蘇看下細(xì)胞活力,確認(rèn)細(xì)胞凍存條件合適后可以開始大量凍存。
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Q4:哪些因素會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡?
有多種因素可能導(dǎo)致這種情況:
1. 二氧化碳濃度不正確:檢查設(shè)置以確保 CO2 水平設(shè)置為適合您的細(xì)胞系的水平(通常在 5% 到 10% 之間);經(jīng)常檢查線路連接是否有泄漏,避免頻繁打開和關(guān)閉培養(yǎng)箱門。
2. 培養(yǎng)箱中的溫度波動(dòng):使用一個(gè)好用的溫度計(jì)在培養(yǎng)箱內(nèi)部監(jiān)測(cè)溫度。
3. 兩性霉素B或其他預(yù)防性抗生素/抗真菌藥物的濃度有毒:按照推薦的濃度使用。
4. 培養(yǎng)箱濕度不正確:檢查水盤中的水位,濕度對(duì)于許多細(xì)胞和培養(yǎng)基而言至關(guān)重要,通常我們需要保證培養(yǎng)箱時(shí)刻有水,也就是飽和濕度。
5. 培養(yǎng)基的滲透壓不正確:大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞可以耐受 260 至 350 mOsm/kg 的滲透壓,過量添加某些試劑和藥物可能會(huì)影響滲透壓。
6. 微生物污染:細(xì)菌和真菌污染通常很容易看到;支原體污染的癥狀比較難辨別,需要仔細(xì)監(jiān)測(cè)細(xì)胞形態(tài)并定期進(jìn)行檢測(cè)以及早發(fā)現(xiàn)污染。
7. 使用了不適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基:確認(rèn)所使用的培養(yǎng)基適用于您的細(xì)胞類型;需確認(rèn)是否含有血清及必須營養(yǎng)成份、是否缺少某些微量元素成份、是否含有其他添加劑及藥物、培養(yǎng)基是否過效期、培養(yǎng)基保存方式是否得當(dāng)。 -
Q5:SU-DHL-6細(xì)胞密度低狀態(tài)不好的時(shí)候,如何調(diào)整比較合適呢
根據(jù)細(xì)胞狀態(tài),可以離心收集所有的細(xì)胞,轉(zhuǎn)移到更小的器皿里培養(yǎng),適當(dāng)提高血清濃度靜養(yǎng)。
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Q6:SU-DHL-6培養(yǎng)到什么程度可以傳代處理,多大比例傳代呢
可以按照密度傳代:5-8X10*5/ml密度傳,細(xì)胞密度不能太稀,否則容易生長緩慢。培養(yǎng)過程中會(huì)有細(xì)胞碎片和黑點(diǎn),屬于正常情況,細(xì)胞密度低時(shí),單顆細(xì)胞較多,密度高時(shí),大部分為聚團(tuán)細(xì)胞。營養(yǎng)消耗較快,培養(yǎng)基易變黃,及時(shí)補(bǔ)液或者換液。
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Q7:SU-DHL-6細(xì)胞復(fù)蘇的時(shí)候有什么需要注意的事項(xiàng)么?
細(xì)胞復(fù)蘇相對(duì)困難,復(fù)蘇后48h內(nèi)不要?jiǎng)蛹?xì)胞。有黑點(diǎn)和碎片也不要擔(dān)心,后續(xù)傳代可以低速離心去掉部分細(xì)胞碎片和黑點(diǎn)哈。
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Q8:不同引種單位的同一株細(xì)胞,RRID都是一樣的嗎?
是的,同一個(gè)細(xì)胞系只有一個(gè)RRID。
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Q9:凍存的細(xì)胞出現(xiàn)顏色不一致,有的紅有的粉,對(duì)復(fù)蘇會(huì)有影響嗎?
這種情況容易在不同凍存批次間出現(xiàn),與凍存細(xì)胞的密度、凍存液配方、溫度導(dǎo)致pH變化等有關(guān),偶爾有遇到這種情況,不是絕對(duì)性對(duì)細(xì)胞狀態(tài)有影響,可以復(fù)蘇看下。
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Q10:培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)瓶可以重復(fù)利用嗎?
一般不建議重復(fù)利用,特別是貼壁不牢固細(xì)胞,重復(fù)利用會(huì)導(dǎo)致吸附性變差,漂浮增多;一個(gè)T25瓶建議使用最多不超過3次,其次需要注意無菌操作,避免污染。


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