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C2C12(小鼠成肌細胞)(STR鑒定正確)

文獻(101) 說明書
一鍵復(fù)制產(chǎn)品信息
https://789.bio/ec/RpqL44
  • https://789.bio/ec/RpqL44
  • https://789.bio/ec/iyuDRC
  • https://789.bio/ec/PtmHRC
  • https://789.bio/ec/eqaam1
  • +3

英文名稱:C2C12

貨號: CL-0044

價格: ¥1600 ¥1600

規(guī)格:
1×10^6Cells/T25 (常溫) 1×10^6Cells/Vial×2Vials (凍存)

注:凍存細胞需加收干冰運費,詳情請咨詢客服。

套餐1

C2C12(小鼠成肌細胞)

¥1600

C2C12細胞專用培養(yǎng)基

350.00 ¥450

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套餐組合價

1950 ¥2050

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱 C2C12(小鼠成肌細胞)
別稱 C2c12;C2-C12;C12
種屬 小鼠
生長特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 成肌細胞樣
凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)方案A(默認) 生長培養(yǎng)基:DMEM [PM150210]+10% FBS [164210]+1% P/S [PB180120]
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO?,5%, 溫度:37℃
推薦傳代比例 1:3-1:6
推薦換液頻率 2-3次/周
注意事項
  1. 該細胞貼壁松散,操作時請盡量輕柔。
  2. 換液時需預(yù)熱培養(yǎng)基。
  3. 收貨如有大塊脫落的細胞團,為正?,F(xiàn)象,請按照收貨注意事項處理。

參考資料(來源文獻)

背景描述 C2C12細胞是由D·Yaffe和O·Saxel建立的小鼠成肌細胞株的亞克??;C2C12細胞分化很快,形成可伸縮的肌管并生成特征性的肌蛋白。用骨形成蛋白2(BMP-2)處理C2C12細胞,會導(dǎo)致C2C12細胞的分化途徑從成肌細胞轉(zhuǎn)換為成骨細胞。檢測表明,C2C12細胞肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。
年齡(性別) 2M;Female
組織來源 骨骼??;品系:C3H
細胞類型 自發(fā)永生化細胞
生物安全等級 BSL-1
保藏機構(gòu) ATCC; CRL-1772 BCRC; 60083 BCRJ; 0058 DSMZ; ACC-565

位點信息

photo1

鑒定圖

photo2
  • Q1:怎么去除死細胞?

    低速離心(800rpm,離心3mim),主要是基于細胞密度和大小進行分離,死細胞和碎片比較輕,會殘留在上清,活的細胞會留在離心管底部哈。這個可以去除大部分死細胞和碎片,但不能完全去除(會有少許殘留)。

  • Q2:有些細胞傳了幾代之后,突然出現(xiàn)了一些圓形的漂浮細胞,這是正常情況?

    這個是正常的,細胞增殖是個動態(tài)的過程,每個細胞所處的狀態(tài)不完全一樣,這種漂浮的細胞里面可能是增殖后還未來的及貼下去的,也可能是一些衰老細胞,我們每次傳代的操作多少會引起一些細胞損傷導(dǎo)致細胞貼壁性能減弱。只要整體細胞增殖情況正常,存在少量這種細胞,可以繼續(xù)培養(yǎng)觀察看看。

  • Q3:剛買回來的細胞傳多少代就凍存比較好?

    建議細胞買回來擴增1~2代后先凍存一管,一周后復(fù)蘇看下細胞活力,確認細胞凍存條件合適后可以開始大量凍存。

  • Q4:哪些因素會導(dǎo)致細胞死亡?

    有多種因素可能導(dǎo)致這種情況:
    1. 二氧化碳濃度不正確:檢查設(shè)置以確保 CO2 水平設(shè)置為適合您的細胞系的水平(通常在 5% 到 10% 之間);經(jīng)常檢查線路連接是否有泄漏,避免頻繁打開和關(guān)閉培養(yǎng)箱門。
    2. 培養(yǎng)箱中的溫度波動:使用一個好用的溫度計在培養(yǎng)箱內(nèi)部監(jiān)測溫度。
    3. 兩性霉素B或其他預(yù)防性抗生素/抗真菌藥物的濃度有毒:按照推薦的濃度使用。
    4. 培養(yǎng)箱濕度不正確:檢查水盤中的水位,濕度對于許多細胞和培養(yǎng)基而言至關(guān)重要,通常我們需要保證培養(yǎng)箱時刻有水,也就是飽和濕度。
    5. 培養(yǎng)基的滲透壓不正確:大多數(shù)哺乳動物細胞可以耐受 260 至 350 mOsm/kg 的滲透壓,過量添加某些試劑和藥物可能會影響滲透壓。
    6. 微生物污染:細菌和真菌污染通常很容易看到;支原體污染的癥狀比較難辨別,需要仔細監(jiān)測細胞形態(tài)并定期進行檢測以及早發(fā)現(xiàn)污染。
    7. 使用了不適當?shù)呐囵B(yǎng)基:確認所使用的培養(yǎng)基適用于您的細胞類型;需確認是否含有血清及必須營養(yǎng)成份、是否缺少某些微量元素成份、是否含有其他添加劑及藥物、培養(yǎng)基是否過效期、培養(yǎng)基保存方式是否得當。

  • Q5:你們實驗室有沒有驗證過C2C12細胞成肌管實驗?

    測試過,普諾賽實驗室分別用2%、4%、6%的馬血清誘導(dǎo)C2C12細胞3~7天,均出現(xiàn)明顯的肌管,其中6%馬血清誘導(dǎo)會更快出現(xiàn)肌管,使用的馬血清貨號:164215。實驗存在很多影響因素,我們總結(jié)了下面幾點影響實驗成敗的因素: (1)細胞傳代密度控制,C2C12細胞增殖較快,建議70~80%密度進行傳代,每次都讓細胞長得過滿可能會影響后續(xù)誘導(dǎo)實驗。 (2)馬血清品質(zhì)和濃度,不同品牌、批次的馬血清對C2C12誘導(dǎo)的效果差異明顯,馬血清誘導(dǎo)濃度一般在2~10%?。 (3)誘導(dǎo)前細胞密度控制,我們驗證了細胞70%密度開始換馬血清進行誘導(dǎo),效果良好。 (4)器皿貼壁性,不同器皿貼壁性存在差異,為了確保細胞誘導(dǎo)過程中的貼壁狀態(tài),建議使用貼壁性較好的器皿,或者使用0.1%明膠包被器皿使用。 (5)誘導(dǎo)周期,大部分情況下,C2C12細胞會在誘導(dǎo)3-7天出現(xiàn)明顯肌管,如果誘導(dǎo)8-10天還未出肌管,實驗可能不太成功,需要重新安排實驗。 (6)預(yù)防污染,細胞污染可能導(dǎo)致實驗失敗,比如細菌污染、真菌污染或者支原體污染。

  • Q6:C2C12細胞傳代比例和消化時間如何判斷?

    建議傳代比例控制在1:3~1:4,這樣既能保證細胞有足夠的生長空間,又能避免細胞生長緩慢的問題。消化時間一般為1~2分鐘,但具體時間需要根據(jù)實際情況調(diào)整。消化時間不宜過長,否則會導(dǎo)致細胞損傷而漂浮過多。消化過程中應(yīng)密切觀察細胞的狀態(tài),鏡下觀察細胞圓縮分散,細胞開始脫落即可終止消化。如果細胞生長較快,為了避免頻繁傳代,可以適當降低傳代密度。

  • Q7:為什么不能讓C2C12細胞長得過滿或出現(xiàn)堆積?

    C2C12細胞生長速度較快,如果不及時傳代,細胞會長滿培養(yǎng)瓶并開始堆積,甚至成片脫落。為了避免這種情況,建議在細胞密度達到70%~80%時進行傳代。

  • Q8:不同引種單位的同一株細胞,RRID都是一樣的嗎?

    是的,同一個細胞系只有一個RRID。

  • Q9:凍存的細胞出現(xiàn)顏色不一致,有的紅有的粉,對復(fù)蘇會有影響嗎?

    這種情況容易在不同凍存批次間出現(xiàn),與凍存細胞的密度、凍存液配方、溫度導(dǎo)致pH變化等有關(guān),偶爾有遇到這種情況,不是絕對性對細胞狀態(tài)有影響,可以復(fù)蘇看下。

  • Q10:培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)瓶可以重復(fù)利用嗎?

    一般不建議重復(fù)利用,特別是貼壁不牢固細胞,重復(fù)利用會導(dǎo)致吸附性變差,漂浮增多;一個T25瓶建議使用最多不超過3次,其次需要注意無菌操作,避免污染。

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